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小鼠(Mouse)色氨酸羟化酶(TPH) ELISA检测试剂盒

时间:2022-01-22 17:11:06      
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小鼠(Mouse)色氨酸羟化酶(TPH)检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被色氨酸羟化酶(TPH)抗体的包被微孔. 中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的色氨酸羟化酶(TPH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品活性。

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小鼠(Mouse)色氨酸羟化酶(TPH)试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、15、30、60、120、240 U/L


小鼠(Mouse)色氨酸羟化酶(TPH)操作步骤

1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.   样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。

4.   除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.   每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


小鼠(Mouse)色氨酸羟化酶(TPH)结果判断

 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。


小鼠(Mouse)色氨酸羟化酶(TPH)试剂盒性能

1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2. 灵敏度:最低检测浓度小于1.0 U/L。

3. 检测范围:1.0 - 240 U/L。

4. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

5. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

6. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

7. 有效期:6个月


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