人（Human）γ-谷氨?；D氨酶5（gGT5）檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被γ-谷氨?；D氨酶5（gGT5）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ-谷氨酰基轉氨酶5（gGT5）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

人（Human）γ-谷氨酰基轉氨酶5（gGT5）試劑盒組成

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、2、4、8、16、32 ng/mL

人（Human）γ-谷氨?；D氨酶5（gGT5）試劑的準備

 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

人（Human）γ-谷氨酰基轉氨酶5（gGT5）試劑盒性能

1.  準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。

2.  靈敏度：最低檢測濃度小于0.1 ng/mL。

3.  特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4.  重復性：板內、板間變異系數均小于15%。

5.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6.  有效期：6個月

自備物品

1.酶標儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

人（Human）γ-谷氨?；D氨酶5（gGT5）操作步驟

1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.   設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.   樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

4.   除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.   棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.   每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.   每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

人（Human）γ-谷氨?；D氨酶5（gGT5）結果判斷

 繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

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