检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被CXC趋化因子配体12（CXCL12）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的CXC趋化因子配体12（CXCL12）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂盒组成

_{注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、300、600、1200、2400、4800 pg/mL}

_操作步骤

_{1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。}

_{2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；}

_{3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。}

_{4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。}

_{5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。}

_{6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。}

_{7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。}

_结果判断

 _{绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。}

_{试剂盒性能}

_{1.  准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。}

_{2.  灵敏度：检测浓度小于10 pg/mL。}

_{3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。}

_{4.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。}

_{5.  贮藏：2-8℃，避光防潮保存。}

_{6.  有效期：6个月}

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